双色蛋白上样缓冲液说明书(Ver01)

DualColor Protein LoadingBuffer（5 X）

双色蛋白上样缓冲液（5 X）

Description 产品描述：

红细胞裂解液(Red Blood Cell Lysis Buffer)，也称ACK Lysis Buffer，是一种用于从人或鼠等的血液或组织细胞样品中裂解并去除无细胞核红细胞的溶液。
    本裂解液经过优化配方，在裂解红细胞的同时几乎不损伤淋巴细胞(lymphocyte)或其它有细胞核的细胞。
    本裂解液的主要有效成分为氯化铵。
    本裂解液不适用于有细胞核红细胞的裂解，例如鸟或禽类的红细胞。
    本裂解液经过无菌处理，处理过的血液或组织细胞样品可以用于后续的原代培养、细胞融合以及核酸或蛋白的提取及各种常规的分析和检测。PBS(10X)，含1.35M NaCl，47mM KCl，100mM Na2HPO4，20mM NaH2PO4，pH值为7.4。
    本PBS溶液经过除菌处理，可以直接用于细胞培养过程中细胞的洗涤或其他常规用途。PBS(10X)，含1.35M NaCl，47mM KCl，100mM Na2HPO4，20mM NaH2PO4，pH值为7.4。
    本PBS溶液经过除菌处理，可以直接用于细胞培养过程中细胞的洗涤或其他常规用途。双色蛋白上样缓冲液 ( DualColor Protein Loading Buffer )是一个完整的缓冲液系统，适合SDS-PAGE电泳前的蛋白样本处理。许多蛋白对pH值的变化(电泳时Tris缓冲液温度波动引起)非常敏感。该优化上样缓冲液可以保护蛋白样本在SDS-PAGE上样前加热处理和电泳过程中不被降解。该上样缓冲液含有的两种示踪染料可监控电泳进程，分别是蓝色和粉红色，此外粉红色染料还可以监控Western杂交时的蛋白转膜过程。DualColor Protein LoadingBuffer还含有SDS和DTT，可完全解离蛋白的所有高级结构。缓冲液的SDS可与蛋白疏水区结合，将蛋白展开并使之带上负电荷。DTT可打开二硫键并破坏残留的二级结构。缓冲液还含有甘油，确保上样后蛋白样本沉积在点样孔中。

本产品含有SDS和DTT，可以用于常规的SDS-PAGE蛋白样品的上样。除了染料不同外，本产品与以溴酚蓝为染料的常规SDS-PAGE蛋白上样缓冲液效果一致。用于常规的SDS-PAGE电泳时，本产品中蓝色染料的迁移率与溴酚蓝一致，红色染料的迁移速度和蓝色染料相近。Tris-Gly电泳体系中，在SDS-PAGE的胶浓度低于15%时，红色染料的迁移速度微快于蓝色染料，胶浓度高于15%时，红色染料的迁移速度微慢于蓝色染料。本产品可以用于转膜后的泳道示踪：本双色SDS-PAGE蛋白上样缓冲液(5X)中含特殊的红色染料，该红色染料可随蛋白转印到PVDF或NC等印迹膜上，从而可以用于泳道位置的指示，便于剪膜等操作。

 

Features 产品特点：

ü                      保护蛋白在SDS-PAGE电泳分离时不会被降解。 

ü                      两种染料(蓝色和粉红色)可用于：示踪电泳进程， 监控Western杂交蛋白转移。

 

Preparation使用说明：

1. 在室温或不超过37℃的水浴中溶解双色SDS-PAGE蛋白上样缓冲液(5X)。水浴溶解后立即室温存放，尽量避免长时间置于水浴中。使用完毕后置于-20℃保存。
2. 按照每4微升蛋白样品加入1微升双色SDS-PAGE蛋白上样缓冲液(5X)的比例，混合蛋白样品和双色蛋白上样缓冲液(5X)。注：本产品稀释至1X后也可以直接用于细胞或组织样品的裂解。
3. 100℃或沸水浴加热3-5分钟，以充分变性蛋白。
注意：如果起始时细胞或组织的用量较大，基因组DNA含量较高，煮沸3-5分钟后有可能仍然比较粘稠或者有粘稠状的半透明物体。此时需要再煮沸5-10分钟或者加入适量稀释成1X的双色蛋白上样缓冲液后再煮沸3-5分钟。充分煮沸后一方面可以使结合在基因组DNA上的蛋白充分释放，同时可导致基因组DNA的部分断裂从而使粘稠感消失，这样就不会影响后续的上样操作了。适当超声或使用1ml注射器反复抽吸也可以打断基因组DNA从而使粘稠感消失。
4. 冷却到室温后，直接上样到SDS-PAGE胶加样孔内即可。
5. 通常电泳至红色或蓝色染料到达胶的底端处附近即可停止电泳。

 

Storage and stability 存储及效期：

冻存-20℃避光干燥密封保存，有效期1年。

重要提醒：

1、       本产品中含少量DTT，有轻微刺激性气味，但不含剧毒的巯基乙醇。

2、       刚从冷冻保存中拿出来，可能会出现SDS的沉淀，建议用温水水浴使其完全溶解后再使用。。

3、       为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

4、       本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品等用途。

Product information 产品信息：