丽春红染色液说明书(Ver01)

丽春红染色液

Description 产品描述：

丽春红(Ponceau S)染色液可以用于PVDF膜、硝酸纤维素膜(nitrocellulose membrane)和醋酸纤维素膜(cellulose acetate membrane)上的蛋白的检测，不适用于尼龙膜的检测。丽春红带负电荷，可以与带正电荷的氨基酸残基结合，同时丽春红也可以与蛋白的非极性区相结合，从而形成红色的条带。丽春红的对聚丙烯酰胺电泳分离转膜后的检测极限是250ng蛋白。

丽春红对蛋白的染色是可逆的，染色后可以用蒸馏水，PBS或其它适当溶液洗去。
    

Features 产品特点：

ü                      使用方便，本底低，灵敏度较高

Preparation使用说明：

A.       醋酸纤维素膜上的总蛋白检测

1.       醋酸纤维素膜蛋白点用后，立刻浸泡在丽春红染色液中，染色5分钟。

2.       染色后，用含10%乙酸（V/V）的洗液漂洗5分钟。倒掉洗液，再用新鲜的丽春红染色液再染色5分钟。

3.       取出纤维素膜，浸泡在甲醇中，漂洗5分钟。

4.       再用漂洗液（含甲醇：乙酸：PEG400=70:30:4）漂洗5分钟。染色完毕，取出晾干，即可观察。

B.       PVDF膜与硝酸纤维素膜上的蛋白检测

1.       蛋白电转后将PVDF膜、硝酸纤维素膜浸没在丽春红染色液中，摇动3-5分钟或更长时间，直至出现清晰条带。对结果作适当记录。

2.       用蒸馏水，PBS或其它适当溶液漂洗2-3次，每次3-5分钟，去除丽春红，进行后续的Western检测。

C.       脱色

1.       对PVDF膜与硝酸纤维素膜上的丽春红染色除去：将膜浸泡在0.1M NaOH溶液中，一般10-30秒，即脱色。

2.       用蒸馏水，PBS或其它适当溶液漂洗2-3次，每次3-5分钟。

D.       注意事项：

1.       本染色液除了不能对尼龙膜进行染色外，其他膜，包括PVDF膜、NC膜等都适用，因为尼龙膜带正电荷。

2.       如果染色效果比较深，背景比较大，可以用去离子水漂洗，要脱色可以使用10%的乙酸漂洗。对于后续是用于测序与免疫反应的，可以用0.1M NaOH来脱色。

3.       如果用的硝酸纤维素膜，一定不要用乙醇或者乙酸来脱色。在Western中，用去离子水能够有效地除去背景。在免疫反应中（如Western）要完全除去条带上的染料，可以用0.1M的NaOH溶液按上述操来脱色。

Storage and stability 存储及效期：

常温避光干燥密封保存，有效期至少1年。

重要提醒：

1、       为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

2、       本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品等用途。

Product information 产品信息：