台盼蓝染色液说明书(Ver01)

Trypan Blue Stain Solution

台盼蓝染色液

Description 产品描述：

台盼蓝(Trypan blue)又称锥蓝或锥虫蓝等，不能透过活细胞正常完整的细胞膜，故活细胞不着色，即产生所谓的拒染现象,而死亡细胞的细胞膜通透性增加，可使染料通过细胞膜进入细胞内，使死细胞着色呈蓝色，是最常用的检测细胞活率的方法。通常认为细胞膜完整性丧失，即可认为细胞已经死亡，这与中性红作用相反。因此，借助台盼蓝染色可以非常简便、快速地区分活细胞和死细胞。台盼蓝是组织和细胞培养中最常用的死细胞鉴定染色方法之一。

Trypan blue stain solution(0.4%)常用于检测细胞膜的完整性以及细胞是否存活。活细胞不会被染成蓝色，而死细胞会被染成淡蓝色。台盼蓝可被巨噬细胞吞噬，故可用于巨噬细胞的活体染色剂。台盼蓝染色后，通过显微镜下直接计数或显微镜下拍照后计数，就可以对细胞存活率进行比较精确的定量，0.4%为最常用的浓度。

Storage and stability 存储及效期：

冷藏2-8℃避光干燥密封保存，有效期至少1年。

重要提醒：

1.                      Trypan blue stain对人体有轻微毒性。

2.                      注意凋亡小体偶尔也有台盼蓝拒染现象。

3.                      为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

4.                      本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品等用途。

试剂盒组成：

Preparation使用说明：

1. 收集细胞：

    对于贴壁细胞先用胰酶和/或EDTA消化下细胞。对于悬浮细胞，则可以直接收集细胞。把收集的细胞在1000-2000g离心1分钟，弃上清，用1毫升或根据细胞的量用适当PBS重新悬起细胞。将待染色细胞用PBS稀释至所需浓度（方法及浓度范围与细胞计数相同）。

2. 台盼蓝染色：

细胞悬液与0.4%台盼蓝溶液以9:1比例混匀（终浓度0.04%），染色3分钟(染色3分钟时间已经足够，染色时间可以更长一些，但不宜超过10分钟)。

例如：180μl细胞悬液，加入20μl  0.4% Trypan Blue Solution染色液，混匀染色3分钟。

3. 计数：

    吸取少量经过染色的细胞，用血细胞计数板计数。通常如果要比较精确地进行定量，每个细胞样品至少数500个细胞，数出蓝色细胞和细胞总数。

    细胞存活率＝(细胞总数－蓝色细胞数)/细胞总数X100%