RFSB-WB抗体快速剥离液
RFSB-0100 100mL/瓶
RFSB-0500 500mL/瓶
RFSB-0500 500mL/瓶
WB 抗体快速剥离液
产品简介
Western一抗二抗去除液(Stripping buffer),用于Western中转移了蛋白的膜的重复利用。在 Western中完成了一抗二抗结合和后续的化学发光检测后,有时还需要检测tubulin、actin等表 达量相对稳定的蛋白作为参照,或检测其它蛋白进行比较。通过使用一抗二抗去除液,充分去 除一抗二抗,可以非常方便地重新利用使用过的膜检测其它蛋白。和重新跑一个SDS-PAGE胶 相比,不仅省时省力,而且可以消除重新上样而带来的误差,使可比性更强。
实验步骤:
在完成Western化学发光检测后,蒸馏水中漂洗5分钟。
弃蒸馏水,加入适量的Stripping buffer (强碱性),至少需把膜完全覆盖。在摇床上漂洗5分钟。
弃Stripping buffer (强碱性),加入蒸馏水漂洗一次。然后再加入足量蒸馏水,在摇床上漂洗5 分钟。
进行封闭(blocking)等Western的后续操作。
产品说明:
1.膜再生或Stripping 的实质是在不影响膜上结合的抗原的条件下,将与抗原分子结合的一抗 和二抗洗脱下来。有许多因素影响抗体从膜洗脱,如膜类型、抗体类型和浓度及其与抗原结合 特性。按下面的说明优化再生液中孵育膜的时间至关重要。
2.确定膜上抗体是否去除与优化再生液孵育膜的时间:用ECL 荧光工作液孵育再生后的膜约1 分钟,然后进行X 光胶片曝光并显影,可确定膜上的抗体是否完全去除。如胶片上显示条带, 表明抗体未完全去除,应继续将膜浸泡在再生液中另外孵育5-10分钟,漂洗。然后再次ECL 检 查膜上抗体是否去除。重复此步骤直到抗体完全去除并确定最佳孵育时间。
3.尽量避免使用干燥保存的膜,干的膜上的抗体很难被Strip 干净。
产品规格
产品编号 | RFSB-0100 | RFSB-0500 |
WB 抗体快速剥离液 | 100mL | 500mL |
储存和稳定性
4℃密封保存,有效期12月。长时间不使用可以-20℃保存。
注意事项:○为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。