阿尔新蓝-核固红染色试剂盒说明书(Ver01)

Alcian Blue & Nuclear Fast Red Solution Kit

阿尔新蓝-核固红染色试剂盒

Description 产品描述：

阿尔新蓝-核固红染色试剂盒是一种通过阿尔新蓝对含有硫酸根(sulfated)的组织如硫酸化黏液物质(sulfated mucosubstances)及含有羧基(carboxylated)的组织如唾液粘多糖蛋白(sialomucins)、透明质酸(hyaluronic acid)及上皮酸性黏蛋白(epithelial acid mucin)等进行染色的试剂盒，同时提供核固红进行复染。本产品对不同组织的石蜡切片和冰冻切片均适用，也可用于血涂片和骨髓涂片的染色。

阿尔新蓝是显示酸性黏性物质最特异的染料，所以阿尔新蓝染色又可以称为粘蛋白染色(mucin stain)。阿尔新蓝染料与酸性黏液物质中酸性基团形成盐键，利用染料的不同pH值，可区分酸性黏液物质的类别：当阿尔新蓝染色液的pH值为1.0时，使含有硫酸根(sulfated)的组织如酸性硫酸化或强硫酸化黏液物质染成蓝色，而不能染色含有羧基的组织；当阿尔新蓝染色液的pH值为2.5时，也可以使结缔组织或软骨中含有羧基(carboxylated)的组织如唾液粘多糖蛋白(sialomucins)、透明质酸(hyaluronic acid)及上皮酸性黏蛋白(epithelial acid mucin)等染为蓝色，但对于含有硫酸根的组织，pH2.5的染色要弱于pH1.0；中性黏蛋白如胃黏膜和Brunner腺体部位的中性黏蛋白等不能与阿尔新蓝反应。核固红染色液复染可使核染成粉红色或红色。

阿尔新蓝-核固红染色试剂盒(pH2.5)染色后酸性黏性物质和细胞核的颜色见下表：

Preparation使用说明：

1.样品处理：

A 对于石蜡切片

石蜡切片的制备：按照常规方法进行取材、固定、洗涤、脱水、透明、浸蜡、包埋、切片、烘片等步骤制备石蜡切片。

二甲苯中脱蜡5-10分钟。

换用新鲜的二甲苯，再脱蜡5-10分钟。

无水乙醇5分钟。

90%乙醇2分钟。

80%乙醇2分钟。

70%乙醇2分钟。

B对于冰冻切片：

冰冻切片的制备：按照常规方法进行取材、速冻、切片、烘片等步骤制备冰冻切片

蒸馏水洗涤2分钟。

C对于血涂片、骨髓涂片：

晾干即可。

2.阿尔新蓝染色液染色

A对于石蜡切片和冰冻切片：

1）. 每个切片滴加50-100μl阿尔新蓝染色液(pH2.5)，置于湿盒中染色1小时，去除染液。蒸馏水洗涤3次，每次10秒。

2）.每个切片滴加50-100µl核固红染色液，染色5-10分钟，去除染液，自来水洗涤5分钟。

3）.切片依次浸入70%乙醇10秒，80%乙醇10秒，90%乙醇10秒，无水乙醇10秒，然后使用二甲苯透明1分钟，中性树脂封片。

4）.在显微镜下观察和拍照。

B对于血涂片、骨髓涂片：

1）.每个切片滴加50-100μl阿尔新蓝染色液(pH2.5)，置于湿盒中染色1小时，去除染液。蒸馏水洗涤3次，每次10秒。

2）.每个切片滴加50-100µl核固红染色液，染色5-10分钟，去除染液，自来水洗涤5分钟。

3）.晾干后在显微镜下观察和拍照。

注：染色过深或过浅应调整染色时间。

Storage and stability 存储及效期：

室温避光干燥密封保存，有效期1年。长期不使用，需要更长的效期可以在4℃或-20℃保存。

重要提醒：

1.                      第一次使用本试剂盒时建议先取1-2个样品进行预实验，摸索染色适宜的条件。

2.                      染色过程应在湿盒中进行，防止染液风干。

3.                      核固红复染的过程推荐浅染，能够分辨细胞核即可，颜色过深有可能影响细胞观察。

4.                      本试剂盒中的阿尔新蓝染色液已配制在酸性溶液中，无须再进行额外的酸化处理。

5.                      如果阿尔新蓝染色液出现沉淀，请勿使用。

6.                      误放入冰箱等低温条件下，核固红染色液会出现析出物。此时可以25-50℃水浴加热，充分溶解并混匀后使用。

7.                      为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

Product information 产品信息：